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在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中表達(dá)重組病毒載體和疫苗是一種高效的生產(chǎn)商品化用量的基因治療和疫苗等相關(guān)生物制品的方法。然而，在生產(chǎn)和純化這些產(chǎn)品的工藝過程中，通常需要使用核酸內(nèi)切酶去除內(nèi)源宿主細(xì)胞DNA和RNA，以及病毒載體生產(chǎn)中未結(jié)合的質(zhì)粒DNA。在純化過程中，內(nèi)切酶的污染必須降低到最低水平。
Cygnus EndonucleaseGTP ELISA試劑盒中的抗體是對(duì)來自粘質(zhì)沙雷氏菌（Serratia marcescens）并通過基因工程改造的核酸內(nèi)切酶免疫親和純化得到的。該試劑盒檢測限約為0.06 ng/ml，是一種靈敏、特異的檢測內(nèi)切酶殘留的方法，適用于純化工藝開發(fā)、工藝監(jiān)控、日常質(zhì)量控制以及產(chǎn)品放行測試中。該試劑盒操作方法簡便，主要原理是含有核酸內(nèi)切酶的樣品同時(shí)與HRP標(biāo)記的anti-endonuclease檢測抗體和96孔板中包被的anti-endonuclease捕獲抗體發(fā)生免疫反應(yīng)結(jié)合。EndonucleaseGTP ELISA試劑盒中包含了用于評(píng)估核酸內(nèi)切酶殘留的所有組分，以及一套校準(zhǔn)的核酸內(nèi)切酶標(biāo)準(zhǔn)品。
EndonucleaseGTP ELISA檢測試劑盒有如下特點(diǎn)：
? 極高的靈敏度 LOD約為0.06 ng/ml，LLOQ約為0.31 ng/ml；
? 各項(xiàng)參數(shù)通過內(nèi)部驗(yàn)證 如批內(nèi)和批間準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度等；
? 操作簡便 兩小時(shí)內(nèi)即可得到檢測結(jié)果；
? 適用于整個(gè)工藝過程 如工藝開發(fā)和監(jiān)控、質(zhì)量控制、產(chǎn)品放行等；
? 適用大部分樣本 適用于定量檢測市面常用Benzonase和DENARASE等核酸酶。
EndonucleaseGTPELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
EndonucleaseGTPELISA批間和批內(nèi)穩(wěn)定性
Cygnus EndonucleaseGTP ELISA試劑盒與同類型產(chǎn)品技術(shù)參數(shù)及操作步驟比較
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同類型產(chǎn)品 |
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技術(shù)參數(shù) |
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LOD/LOQ |
0.06ng/ml / 0.31ng/ml |
0.2ng/ml / NA |
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檢測范圍 |
0.31 - 20ng/ml |
NA |
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精密度 CV% |
批間 3.6-5.1；批內(nèi) 2.9-4.3 |
NA |
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準(zhǔn)確度 Recovery% |
92 – 103 |
NA |
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操作 |
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試劑準(zhǔn)備 |
標(biāo)準(zhǔn)品，檢測抗體，洗脫液均為即用型 |
標(biāo)準(zhǔn)品，檢測抗體，洗脫液需先進(jìn)行制備 |
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標(biāo)準(zhǔn)品稀釋 |
即用型，無需稀釋 |
標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，約15mins |
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檢測體系 |
Anti-endonuclease：HRP + TMB |
Anti-endonuclease：HRP + TMB |
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洗脫步驟 |
1 |
2 |
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總共實(shí)驗(yàn)時(shí)間 |
~1小時(shí)35分鐘 |
4小時(shí) |
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
英文名稱 |
中文名稱 |
規(guī)格 |
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F960 |
EndonucleaseGTP ELISA kit |
核酸內(nèi)切酶殘留檢測試劑盒 |
96 wells |
對(duì)于疫苗、細(xì)胞及基因治療領(lǐng)域，Cygnus還提供針對(duì)不同常用表達(dá)系統(tǒng)的宿主蛋白殘留檢測試劑盒、檢測不同細(xì)胞培養(yǎng)基組份，如BSA、HAS、Transferrin、Insulin等ELISA試劑盒、以及宿主殘留DNA提取和檢測試劑盒。如需了解詳情，請(qǐng)致電北京西美杰010-88597838更多資料。