ATA-7050高壓放大器在微流控芯片三維培養(yǎng)細胞并用于藥物毒性評價中的應用
本文將與大家分享,ATA-7050高壓放大器在微流控芯片三維培養(yǎng)細胞并用于藥物毒性評價中的應用,希望能對各位工程師有所幫助與啟發(fā)。
幾十年來,二維細胞培養(yǎng)已成為體外篩選藥物的主要培養(yǎng)方式。但是,由于二維培養(yǎng)出的細胞不具有特定的組織結構,通常需要使用三維細胞培養(yǎng)模型進行二次篩選。二維培養(yǎng)模式和三維培養(yǎng)模式在篩藥模型中各具有其優(yōu)點,二維培養(yǎng)模式中,氧氣含量、養(yǎng)分和代謝廢物分布均勻,而三維培養(yǎng)模式中具有類器官的組織架構,細胞間以及細胞外基質之間能夠相互作用。
近期,赫爾辛基大學TiinaSikanen教授團隊設計了一種并行細胞培養(yǎng)的微流體裝置,結合二維培養(yǎng)和三維培養(yǎng)的優(yōu)點,以二維(單層)和三維(橢球)的形式并排但分離的在完全相同的環(huán)境下培養(yǎng)細胞,用于藥物細胞毒性評估,相關研究成果發(fā)表在AFM期刊上。
研究人員設計的微流體裝置(如圖1)由有機改性的陶瓷材料制成,具有生物相容性并且無需任何額外的涂層即可實現細胞粘附,使用PDMS密封微流體平臺。微流體平臺包括兩套薄膜金電極,印刷在陶瓷材料基底上,通過阻抗光譜法促進了單層培養(yǎng)中的細胞生長和完整性監(jiān)測。該平臺還包括三排凹形微孔,這些微孔具有排斥細胞、支持細胞粘附(二維細胞單層培養(yǎng))和疏水表面(三維細胞培養(yǎng)容器)的特性。
圖1微流體并排二維和三維細胞培養(yǎng)設備及測定
為了誘導三維球體形成,研究人員使用單步光刻工藝來制造凹形微孔,該微孔通過納米功能化(例如,等離子體多孔化和疏水涂層)制成具有排斥細胞作用的微孔。因為微孔的凹形形狀,在微流體流動的情況下,產生的球狀體可以釋放出來,以便進行進一步表征。微流體平臺中微孔的深度和橫截面形狀由紫外線照射劑量控制,隨著紫外線劑量的增加,微孔截面形狀會從矩形變成圓形(如圖2)。
圖2微流體平臺微孔研究
接著,研究人員對微流體裝置上的細胞進行表征,通過阻抗譜測定出二維和三維細胞培養(yǎng)之間存在有效隔離。在二維細胞培養(yǎng)上,通過金電極匯集細胞在電極附近聚集,在20分鐘內達到了大約80%的匯集度。通過將肝細胞接種到微流體裝置微孔中,驗證了三維培養(yǎng)細胞微球體的可行性(如圖3)。
圖3三維培養(yǎng)細胞微球體檢測
最后,研究人員驗證微流體裝置對藥物篩選的可靠性,通過添加抗癌藥物紫杉醇,檢查藥物對并行二維和三維肝細胞培養(yǎng)的影響。紫杉醇通過與β-微管蛋白結合而導致細胞周期停滯到G2/M期,進而導致細胞核變形和生長停滯。結果表明,在二維培養(yǎng)中,暴露在高劑量紫杉醇中的細胞有74.6±10.3%停止在G2/M期;暴露在低劑量紫杉醇中的細胞有90.2±0.8%細胞停止在G2/M期,該結果與以前的文獻非常吻合。在三維培養(yǎng)中,暴露在高劑量紫杉醇中的微球體直徑由104±8μm變?yōu)?9±14μm;暴露在低劑量紫杉醇中的微球體直徑由114±14μm變?yōu)?18±12μm,沒有明顯差異。此外,釋放球體后通過片外光學顯微鏡觀察到了球體大小,形狀和核形態(tài)的明顯變化(如圖4)。
圖4驗證并行細胞培養(yǎng)裝置
在這項研究中,研究人員建立并驗證了用于同時培養(yǎng)二維細胞單層和三維細胞球體的微流體裝置。從藥物篩選的角度來看,最關鍵的是能否以可重現的方式培養(yǎng)小的均勻球狀體,并釋放出球狀體,以便在暴露于藥物后的細胞進行進一步分析。在單個光刻步驟中創(chuàng)建圓形微結構以及隨后進行表面功能化,制作出能夠在微流體流動情況下進行三維細胞球體培養(yǎng)的U型微孔。改性陶瓷材料的固有表面特性能夠滿足細胞和金屬的牢固粘附,這有助于實施二維細胞單層培養(yǎng),并借助阻抗譜(通過集成電極)對未修飾的平面部件進行無創(chuàng)監(jiān)測??偟膩碚f,這項技術可全面評估藥物在二維和三維結構中對細胞的影響。
帶寬:(-3dB)DC~5kHz
電壓:10kVp-p(±5kVp)
電流:20mAp
功率:100Wp
壓擺率:≥111V/μs
本資料由Aigtek安泰電子整理發(fā)布,更多案例及產品詳情請持續(xù)關注我們。本資料由Aigtek安泰電子整理發(fā)布,更多案例及產品詳情請持續(xù)關注我們。西安安泰電子是專業(yè)從事功率放大器、高壓放大器、功率放大器模塊、功率信號源、射頻功率放大器、前置微小信號放大器、高精度電壓源、高精度電流源等電子測量儀器研發(fā)、生產和銷售的高科技企業(yè),為用戶提供具有競爭力的測試方案。Aigtek已經成為在業(yè)界擁有廣泛產品線,且具有相當規(guī)模的儀器設備供應商,樣機都支持免費試用。如想了解更多功率放大器等產品,請持續(xù)關注安泰電子官網www.gairou.cn或撥打029-88865020。
原文鏈接:http://www.gairou.cn/news/2345.html