真空離心濃縮儀在法醫(yī) DNA 樣本濃縮的應(yīng)用
·真空離心濃縮儀在法醫(yī) DNA 樣本濃縮的應(yīng)用·
濃縮作為微量疑難檢材提取中常用的方法，目前常用的有Amicon離心超濾管、DNA Clean & Concen?trator-5 試劑盒、Microcon-100 法等，以上濃縮均需在不同的管柱間轉(zhuǎn)移 DNA 模板，不可避免造成 DNA 損耗，同時增加了污染的概率。
真空離心濃縮技術(shù)是改良的物理濃縮法，其原理是利用離心力、加熱和真空作用揮發(fā)液體，達(dá)到濃縮、干燥 DNA 的目的。在達(dá)到固定轉(zhuǎn)速后啟動真空抽吸，揮發(fā)的液體回收至密閉容器，有效避免樣品交叉污染和實驗室污染。該方法可同時濃縮多個樣品，通過去離子水量調(diào)節(jié)濃縮倍數(shù)，具有一定的簡便性和靈活性。
48 份現(xiàn)場物證 DNA 模板經(jīng)真空離心濃縮儀濃縮 4.4 倍至 7.7 倍后，獲得的圖譜分型峰高明顯提高。峰值均衡性改善，判別出部分非特異性帶和假純合子，等位基因數(shù)由 1334 個增加到 1942 個，有效分型樣本由 19 份增加到 27 份。部分樣本圖譜質(zhì)量顯著改善（見圖 1）。
真空離心濃縮技術(shù)有以下特點：①濃縮時間相對短。45℃下，恒溫混勻儀干燥 50μl 液體耗時 8小時以上，真空離心濃縮技術(shù)僅需約 1 小時；②濃縮和回收液體均在密閉環(huán)境中，降低實驗室污染風(fēng)險；③操作便捷，濃縮倍數(shù)靈活，濃縮過程一管完成，DNA 損耗少；④經(jīng)濟(jì)實用。
僅需一臺真空離心濃縮儀，即可在現(xiàn)有的提取純化方法基礎(chǔ)上長期應(yīng)用。真空離心濃縮技術(shù)適用于提取純化后模板體積較大、抑制物少、原檢驗圖譜分型不理想的DNA 樣本濃縮，可以提高微量疑難檢材的檢驗成功率。
海朗Hallan真空離心濃縮儀可同時處理多個樣品，無需擔(dān)心交叉污染。系統(tǒng)內(nèi)程序可設(shè)定至多36個，主機(jī)可根據(jù)不同的樣品對整機(jī)的真空度進(jìn)行調(diào)節(jié)，設(shè)備采用皮拉尼真空計可實時顯示腔體內(nèi)的真空度，并保證真空度的真實性，真空設(shè)置范圍0.1~1000mbar，控制精度0.1mbar。根據(jù)不同的樣品可對整機(jī)轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)節(jié)，更換轉(zhuǎn)子無需使用工具，且可與凍干系統(tǒng)聯(lián)用。
參考資料：doi:10.13618/j.issn.1001-5728.2019.05.010
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