化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>技術(shù)服務(wù)>細(xì)胞生物學(xué)服務(wù)>細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)>CC96146 Rosetta-gami B 感受態(tài)
CC96146 Rosetta-gami B 感受態(tài)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語(yǔ)純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) CC96146
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2024/11/1 15:12:45
- 訪問次數(shù) 138
產(chǎn)品標(biāo)簽
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Rosetta-gami B 系列菌株來源于 Origami B 系列菌株，是集合了 BL21 系列，Rosetta 系列菌株和
Origami 系列菌株的優(yōu)點(diǎn)，極大的增強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真
核細(xì)胞蛋白的表達(dá)能力。Rosetta-gami B系列菌株是來源于 Origami B系列菌株，攜帶有TrxB和Gor
基因突變，提高含二硫鍵正確折疊 蛋白的高效表達(dá)。本菌株含有 pRARE 質(zhì)粒，能夠提供原
Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個(gè)稀有密碼子的 tRNA 外，增
加了真核細(xì)胞的在大腸桿菌中的蛋白表達(dá)水平。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase
(gor)基因上同時(shí)含有突變，這使得該菌株能夠更加高效的在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵，有助于含二硫
鍵蛋白的活性蛋白形成。TrxB 和 Gor 基因突變使得質(zhì)粒能夠分別具有卡那和四環(huán)素抗性，所以本
菌株無(wú)法用于卡那和四環(huán)素抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。Rosetta-gami B感受態(tài)細(xì)胞來源于含有 BL21系列
菌株中的 lacZY 基因突變，能夠通過 IPTG 高效控制目的基因的表達(dá)。Rosetta-gami B 感受態(tài)細(xì)胞能
夠用于氨芐抗性和壯觀m素抗性質(zhì)粒的原核表達(dá)。Rosetta-gami B 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，
pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta-gami B
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC gor522::Tn10 trxB pRARE (CamR , KanR , TetR)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔