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當前位置：匯智和源生物技術(shù)（蘇州）有限公司>>2 遺傳毒性試驗產(chǎn)品>>體外染色體畸變試驗產(chǎn)品>> 221011體外染色體畸變試劑盒（CA試驗）
產(chǎn)品型號：221011
品 牌：IPHASE
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)商
所 在 地：北京市
| CAS | 無 | 純度 | 無 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 無 | 分子式 | 無 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5mL×20 體系/盒 |
| 貨號 | 221011 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
| 主要用途 | 遺傳毒性試驗,體外染色體畸變試驗 |
體外染色體畸變試驗
體外染色體畸變試驗的目的是檢測培養(yǎng)的哺乳動物細胞染色體結(jié)構(gòu)畸變。結(jié)構(gòu)畸變可份為染色體型和染色單體型。大多數(shù)化學致突變物誘導染色單體型突變，但染色體型突都也可發(fā)生。多倍體增加表明受試物可導致染色體數(shù)目畸變。但是，本方法不用于檢測數(shù)目畸變。染色體突變和相關(guān)事件可以引起很多人類遺傳性疾病，并且有證據(jù)表明，引起體胡魔癌基因和抑癌基因改變的染色體突變以及相關(guān)事件，與人類和實驗動物的腫瘤發(fā)生有關(guān)。體外柴色體畸變試驗可應用于已建立的細胞系、細胞株或原代細胞培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)生長能力、核型的穩(wěn)定性、染色體數(shù)目、染色體差異以及染色體響變的自發(fā)頻率選擇合適的細胞。
體外染色體畸變試劑盒 IPHASE in vitro mammalian chromosome aberration test kit (CHL)
北京匯智泰康醫(yī)藥技術(shù)有限公司針對染色體畸變試驗開發(fā)染色體畸變試驗試劑盒， 本試劑盒省去了陽性底物成分準備、誘導 S9 制備，可以直接使用，大大縮短了實驗周期；試劑盒各成分均經(jīng)過嚴格的質(zhì)量檢測，無雜菌污染，誘導 S9 活性均符合染色體畸變試驗要求，實驗結(jié)果準確、可靠、重現(xiàn)性高。染色體畸變試驗試劑盒應用廣泛，可進行食品、化學品、農(nóng)藥、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個方面的遺傳毒理學檢測。
體外染色體畸變試劑盒使用說明書
【試驗原理】
在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下，使培養(yǎng)的哺乳類動物細胞暴露于受試物中，用中期分裂相阻斷劑秋水仙素進行處理，使細胞停止在中期分裂相，隨后收獲細胞、制片、染色并分析受試物是否誘發(fā)體外培養(yǎng)的哺乳類細胞染色體畸變，從而評價受試物致突變的可能性。
【產(chǎn)品組成】
| 組分 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | 使用說明 | 保存條件 |
| S9復合物 | 2mL | 1 | / | -70℃ |
| 磷酸鹽緩沖液 | 10 mL | 1 | 使用前混勻 | |
| （CP） | 0.5 mL | 1 | 800 μg/mL，使用前混勻 | |
| 四列毒C（MMC） | 0.5mL | 2 | 20 μg/mL，使用前混勻 | |
| 秋水仙素 | 1.5 mL | 1 | 20 μg/mL，使用前混勻 | |
| 中國倉鼠肺細胞（CHL） | 1 mL | 1 | / |
【產(chǎn)品使用說明】
1、細胞復蘇
從-70冰箱取出細胞，于37℃水浴融化，1000rpm離心5min，棄上清，用含10%牛血清RPMI 1640培養(yǎng)液（RPMI-10）中重懸細胞；1000rpm再次離心5min，棄上清，用RPMI-10重懸后接種于細胞瓶中培養(yǎng)。
2、細胞準備
將處于對數(shù)生長期，貼壁生長良好的CHL細胞用0.25 %（ Trypsin-EDTA）消化處理制成細胞懸液，5 mL/瓶接種于25cm2細胞培養(yǎng)瓶中，于37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)箱中加濕培養(yǎng)約24 h-48h。
3、染毒處理
吸去培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，加入一定濃度的受試物、S9混合液（不加S9混合液時，需用培養(yǎng)液補足）以及一定量不含血清的培養(yǎng)液，于培養(yǎng)箱中處理6h。在收獲細胞前4 h加入細胞分裂中期阻斷劑秋水仙素溶液（終濃度為0.2 mg/mL）。具體試驗方案見下表：
1）S9混合液配制
| S9混合液配制（10mL） | ||
| S9復合物 | 1.6mL | 現(xiàn)配現(xiàn)用。使用過程中，于冰浴條件下保存。 試驗結(jié)束后，剩余溶液應丟棄，不可重復使用。 |
| 磷酸鹽緩沖液 | 8.4mL | |
2）推薦染毒培養(yǎng)體系配制方案（以3個受試物劑量組為例）
| 處理方式 | 組別 | 培養(yǎng)液體積（mL） | S9混合液體積（mL） | 受試物體積（mL） | 溶劑體積（mL） | 陽性對照體積（mL） | |
| CP | MMC | ||||||
| 活化 | 陽性對照 | 4.45 | 0.5 | / | / | 0.05 | / |
| 劑量1 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量2 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量3 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 溶劑對照 | 4.45 | 0.5 | / | 0.05 | / | / | |
| 不活化 | 陽性對照 | 4.95 | / | / | / | / | 0.05 |
| 劑量1 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量2 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量3 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 溶劑對照 | 4.95 | / | / | 0.05 | / | / | |
注：24小時染毒所用陽性底物需稀釋2倍后加入0.05 mL。
4、收獲細胞及制片
用0.25%的溶液消化細胞，加入0.075mol/路化甲溶液進行低滲處理，固定液（甲醇：斌戳酸=3：1）進行固定并滴片，用吉姆薩染液染色，中性樹膠封片，并于油鏡下進行閱片，記錄畸變細胞的坐標位置及畸變類型，具體操作方法參照國標方法進行。
5、畸變類型分析及結(jié)果判定
結(jié)果分析及判定可參照：473 體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗，《化學品測試方法·健康效應卷》（第二版），2013年，(ISBN：978-7-5111-1476-1)。
【注意事項】
1.實驗前請自行準備RPMI 1640培養(yǎng)液、牛血清、細胞培養(yǎng)瓶、24孔細胞培養(yǎng)板、滅菌槍頭、無菌移液管、二氧化碳培養(yǎng)箱、振蕩器、15、50mL離心管等，所有耗材需做無菌處理。
2.實驗操作應在符合細胞培養(yǎng)實驗要求的環(huán)境下進行。
匯智泰康是一家位于中美兩地的生物醫(yī)藥合同研發(fā)機構(gòu)，整合中美兩地的藥物研發(fā)技術(shù)服務平臺，基于AAALAC、GLP、ISO/IEC 17025實驗室認證，面向很多企業(yè)及研發(fā)機構(gòu)提供分析化學、DMPK、藥理藥效、生物學、以及毒理安全性評價產(chǎn)品與服務。
主要產(chǎn)品：
體外藥物代謝產(chǎn)品
Ⅰ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
Ⅱ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
CYP450酶代謝表型研究試劑盒
不同種屬肝微粒體，肝S9
重組酶，標準品，孵育系統(tǒng)等
遺傳毒性產(chǎn)品
Ames試劑盒
體外染色體畸變試驗試劑盒
TK基因突變試驗試劑盒
HPGRT基因突變試劑盒
彗星試驗試劑盒
誘導大鼠肝S9等
空白生物基質(zhì)
空白血清：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
空白血漿：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
空白血：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
空白尿液：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠
北京匯智泰康醫(yī)藥技術(shù)有限公司
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