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人紅白細胞白血病細胞
  • 人紅白細胞白血病細胞
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更新時間:2025-01-08 17:02:59瀏覽次數(shù):30評價

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人紅白細胞白血病細胞(HEL) HEL細胞是一株淋巴母細胞樣細胞株,源自一位30歲白人男性;該患者患有惡性紅細胞白血病,能夠自然產(chǎn)生并能誘導(dǎo)球蛋白合成。

人紅白細胞白血病細胞(HEL)  HEL細胞是一株淋巴母細胞樣細胞株,源自一位30歲白人男性;該患者患有惡性紅細胞白血病,能夠自然產(chǎn)生并能誘導(dǎo)球蛋白合成。

【細胞名稱】人紅白細胞白血病細胞

【細胞別名】HEL

【種屬來源】人

【組織來源】外周血

【細胞形態(tài)】淋巴母細胞樣

【生長特性】半貼壁半懸浮

【培養(yǎng)體系】1640+10%FBS+1%P/S

【傳代比例】1:2-1:4,每周換液2-3 次

【培養(yǎng)條件】氣相:95%空氣+5%二氧化碳,溫度:37℃

【凍存條件】凍存液:55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO;存儲條件:液氮

【安全性】建議在二級生物安全臺內(nèi)操作,并做好個人防護。

【用途】僅供科研使用


二、復(fù)蘇及傳代方法

1、細胞株的復(fù)蘇(凍存管)

(1)將凍存管在37℃水浴鍋中迅速融化,并適當輕輕搖晃促融??焖?、融化可以提高細胞的復(fù)蘇效果。

(2)打開凍存管前時用75%酒精擦拭細胞凍存管外壁。

(3)將融化的細胞直接離心,或者轉(zhuǎn)移至無菌15ml或其它合適無菌離心管中,400g離心5min,吸除上清,注意不要吸走細胞沉淀,然后用新鮮*全培養(yǎng)液重懸后轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)器皿,混勻,置于CO2培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)。

(4)第二天視貼壁或生長狀態(tài),更換培養(yǎng)液。

注意:如果收到的凍存管不能及時進行復(fù)蘇,還請置于-80℃或液氮中進行暫存,并盡快復(fù)蘇進行培養(yǎng)。

2、細胞株的復(fù)蘇(T25瓶)

(1)將收到T25瓶脫外包后用75%酒精擦拭瓶外壁。

(2)置于倒置顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),看是否有異常;無異常后,采用移液器移去多余的培養(yǎng)液,置于CO2培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)過夜。

(3)第二天視貼壁或生長狀態(tài),考慮進行換液或傳代,傳代比例參考1:2~1:4。

三、注意事項

1、每支凍存管約含1×106個細胞,體積為1ml,預(yù)期存活率60-90%,建議復(fù)蘇至1個T25瓶或1個6cm培養(yǎng)皿中。如果復(fù)蘇后存活率較低,可以消化后轉(zhuǎn)移至3.5cm培養(yǎng)皿/T12.5瓶中,這樣細胞生長會更好。

2、如果本產(chǎn)品是常溫運輸,并且是培養(yǎng)瓶中充滿*全培養(yǎng)液的貼壁細胞,收到細胞后:

(1)及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。

(2)用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2~4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

(3)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息。

(4)靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)。

3、如果細胞密度超過85%請盡快進行傳代操作;如果懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)箱中靜置過夜以使懸浮的細胞再次貼壁。如果收到的是常溫運輸?shù)碾x心管裝的懸浮細胞,可以直接取出轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。若培養(yǎng)液顏色正常則保留培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),并且在*次更換培養(yǎng)液時,保留一半原培養(yǎng)液,并加入一半新鮮培養(yǎng)液,這樣可以盡量避免由于培養(yǎng)液或血清差異導(dǎo)致細胞生長的不適應(yīng),確保細胞良好的生長狀態(tài)。

4、細胞培養(yǎng)請在生物安全柜臺中進行操作,并嚴格遵守無菌操作。


上海牧榮生物科技有限公司

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