荧光微球免疫法玉米黄曲霉毒素含量快速测试方法
方案检测原理:应用时间分辨荧光竞争抑制免疫层析的原理,当将样品滴加在加样区时,样品中的待测物与结合垫中的荧光微球标记抗体结合并通过毛细作用向前层析,当达到检测区后,检测线 T 线上固定的抗原与剩余的部分荧光微球标记抗体结合,检测线 T 线上结合的荧光微球标记抗体的量与样品中待测物的量成反比,质控线 C 线结合的荧光标记物样品中待测物的量无关,其它荧光标记物继续层析达到吸收区。层析结束后,用CSY-YG701读取 T 线和 C 线的荧光强度并计算 T/C 值,通过仪器内置的标准曲线即可计算出样品中待测物的含量。
方案介绍:玉米中黄曲霉毒素含量快速定量检测方案选用CSY-YG701黄曲霉毒素荧光定量检测仪(深圳市芬析仪器制造有限公司)、电子天平、离心机、粉粹机、涡旋振荡器检测设备,该方法操作简单,结果准确,整体测试时间20分钟左右。
一、实验所需器皿准备
1、CSY-YG701黄曲霉毒素荧光定量检测仪(深圳市芬析仪器制造有限公司)
2、电子天平(国产)
3、离心机(国产)
3、粉粹机(国产)
4、涡旋振荡器(国产)
5、可调移液器1000-5000ul 可调移液器 20-200ul(国产)
二、样品前处理
1、准确称取2.0g粉碎均匀的谷物样本,放入50ml离心管或者锥形瓶中,加入10ml样品提取液,用旋涡振荡器震荡3分钟混匀,混匀后即为样品液。
2、混匀后,取1.5ml均匀的样品液在离心管,并在3500转以上离心5分钟。
3、取离心液上清液200ul+1000ul样品提取液震荡5秒混匀即为待测液。
三、样品检测
1、开始检测:取60ul待测液+60ul荧光标记物,放入新的离心管中,把移液器刻度调至90ul,然后在离心管中吸吐3次液体(避免气泡出现),混匀之后取90ul滴入检测卡内(本步骤应该在30s内完成),滴入完成之后,立即将检测卡放入恒温孵育器内孵育8分钟后进行检测。