Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程当中逐渐扩展

从第一次用到呼吸道自身免疫反应会当到用到1DF冠心病诊断腹泻的方面率在学童中会后期就有比较好的刻画，多个呼吸道自身免疫反应会当乙型肝炎的学童中会有70%在血液转换后10年内患上冠心病，而随访15年的学童这一比重提高到84%。相更为之下，占诊断1DF冠心病一半以上的DF1DF冠心病的肺癌机制还无法想得到充分的科学研究。

越来越多的人开始采用分期系统来定义1DF冠心病的方面：生殖在用到多种呼吸道自身免疫反应会当时进入第1阶段，用到血糖异常时进入第2阶段，用到腹泻时进入第3阶段。一些多发呼吸道自身免疫反应会当乙型肝炎的生殖，在1期和2期，方面较更为慢，并发展为肺癌的1DF冠心病。我们之前刻画了一第三组在首次检验到多种呼吸道自身免疫反应会当采样后大概10年无冠心病的极更为慢方面者，这第三组病变人数少，但基本特征非常恰当。随后，我们发现呼吸道自身免疫特异性CD8+T本站粒体反应会当在方面平稳的病变中会也就是说不实际上，但在近期肺癌和长期以来实际上的冠心病病变中会很容易检验到。这可能表明，与方面病变相更为，这些病变自身免疫反应会当的调节进一步提高。

早期科学研究表明，尽管调节性T本站粒体(Treg)数量经常性，但冠心病病变实际上一些功能性缺点，其中会之外对IL-2的反应会当能力下降。此外，冠心病病变中会的effect当CD4+T本站粒体可能对调节更具抵抗性，表现为effect当T本站粒体的依赖性减弱，自然产生的Treg和肾脏产生的诱导Treg，以及免疫经历的CD4+T本站粒体中会IL-2反应会当减弱。本科学研究的目的是刻画了CD4+调节性T本站粒体(Treg)在一小群极平稳方面者中会的基本特征，他们的平均平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法有：BOX科学研究是一项以人群为基础的纵向科学研究，在21岁请注意确诊的病变血亲中会检查1DF冠心病的危险考量。我们之前刻画了长期以来平稳方面者的基本特征，他们维持多重呼吸道自身免疫反应会当乙型肝炎有约10年，但无法用到冠心病的诊断腹泻，更为慢性或非性虐待自身免疫。随后，10名独自维持无冠心病并主动缺少大量血液采样的平稳方面者纳入T和B本站粒体功能性系统性。在目前的科学研究中会，8名更为慢方面者(SP第三组)，中会位平均年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的呼吸道自身免疫反应会当乙型肝炎。所有的参与者都处于1DF冠心病方面的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身免疫反应会当对某些免疫的乙型肝炎反应会当，然而，一名病变并未处于2期大概6年，但无法用到诊断腹泻，一名病变被诊断为冠心病，该受试者72岁，在热带植物实验采样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在建模中会对该ADP完成了单独评量。除去外周血单个核本站粒体(PBMCs)，采用多参数流式本站粒体忍术和T本站粒体依赖性试验评量ADP中会Treg的kHz、表DF和功能性。采用FlowSOM和CITRUS(聚类鉴别、表征和回归)完成无行政官员聚类系统性，评量Treg表DF。

结果：与有益ADP相更为，来自更为慢方面体的遗忘CD4+T本站粒体的行政官员聚类看出，激光阴的遗忘CD4+ TregkHz提高，与持续性诱导的TNFR特别蛋白(GITR)理解提高有关。一名HbA1c升高的病变与方面平稳者和最简单的对照第三组相更为，Treg谱有所各不相同。功能性系统性表明，与有益ADP相更为，来自平稳方面体的Treg内皮细胞的CD4+effect当T本站粒体依赖性相较来说受到影响。表现为对effect当CD4+T本站粒体CD25和CD134理解的依赖性提高。

所示1 深入的表DF系统性看出，CD4+Treg亚DF在更为慢方面函数调用中会提高。由FlowSOM分解成的Treg室，聚集在来自所有ADP的光阴CD4+CD45RA -本站粒体上。根据标示物理解鉴别成10个元簇:遗忘T本站粒体_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T本站粒体;HLA-DR + GITR +遗忘T本站粒体;闪存Treg_1;闪存Treg_2;闪存Treg_3;和闪存Treg_4。(a)采用9个各不相同Treg标示分解成的10个元簇的MST。每个路由器都是一个炮兵部队(100个炮兵部队)，极大的元炮兵部队(10个元炮兵部队)在路由器第三组周围上色。每个路由器中会的煎饼所示对此单个标示的理解层次。(b)每个元聚类的热所示，以看出整体标示理解。(c, d)为HD第三组(c)和SP第三组(d)分解成所示，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相较总质量为每个metacluster箱内本站所示(总质量> 0.05%)确切为HD和SP第三组:闪存Treg_2 (e),闪存Treg_3 (f),闪存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T本站粒体(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T本站粒体(l)。浅蓝色格子都是**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon相加符号秩检验。此键适用于所示形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

所示2 采用CITRUS的预测模DF证实，TregkHz的提高是方面平稳的图案。这两项暂时性(a - f)和柑橘系统性(g-k)更为SP参与者和最简单的HD参与者在CD4+CD45RA−T本站粒体上的歧异。(a)流感病毒CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群体的都是性所示。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR理解完成除去，模拟FlowSOM群体。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)第三组以及ADPSP 606(浅蓝色)中会CD25+ cd127的kHz统计所示。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+暂时性子集的箱内本站所示;(c) HLA-DRloGITR−(闪存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(闪存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(闪存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+闪存T cell)。(g - i)油菜簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解强度着色，箭头突成的簇被识别为SP和HD函数调用之间的各不相同。(j)箱内本站所示看出了在SP(蓝点)和HD(灰点)第三组中会，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相较总质量(比重)。(k)灰度看出每个簇的表DF(红色)和Treg标示相较理解与背景理解(紫色);上列，闪存Treg_3;下面一行，闪存Treg_4。背景与所有其他簇中会标示的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon相加符号秩检验

所示3 与有益献血者相更为，方面平稳者遗忘treg的GITR提高。每个遗忘CD4+T本站粒体元簇(遗忘T本站粒体_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T本站粒体;HLA-DR + GITR +遗忘T本站粒体;闪存Treg_2;闪存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检验每个理解标示的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)函数调用的理解热所示(sp606不之外在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇中会所有HD(灰色)、所有SP(紫色)和SP 606(浅蓝色)的FlowSOM GITR理解接在，看出灰度(c)和统计所示(d)。Wilcoxon相加符号秩和检验，p< 0.07(浅蓝色)所有ADP之外，p< 0.05(紫色)ADPSP 606和最简单的HD不之外在测试中会。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中会GITR理解，从这两项暂时性，从所有HD(灰色)、所有SP(紫色)和SP 606(浅蓝色)接在，看出灰度(e)和统计所示(f) *p< 0.05, Wilcoxon相加符号秩检验

所示4 来自平稳方面的CD4+ treg本站粒体控制effect当CD4+T本站粒体的能力下降。SP第三组用紫色的本站和格子对此，HD第三组用黑色的本站和格子对此，浅蓝色的本站/格子对此ADPsp606。采用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T本站粒体完成分选。CD4+CD25−(应当答者)被标示为CFSE, Treg按观察的比重滴定。用抗CD3 /28微珠光阴化本站粒体，培育出3天后完成流式本站粒体忍术检验。(a-d)与CD4+应当答者相较应当的treg培育出(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应当答者培育出。(a,b,f) CFSE转化(a,e)和CFSE依赖性百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的依赖性百分比。采用乙型肝炎对照(激光阴的响应当本站粒体包含treg)计算依赖性百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重更为测试

所示5 effect当CD4+T本站粒体对平稳方面的T本站粒体光阴化的依赖性更恰当。SP第三组用紫色的本站和格子对此，HD第三组用黑色的本站和格子对此，浅蓝色的本站/格子对此ADPsp606。采用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T本站粒体完成分选。CD4+CD25−(应当答者)被cfsel标示，treg按观察的比重滴定。用抗CD3 /28微珠光阴化本站粒体，培育出3天后完成流式本站粒体忍术(CD25反染)和本站粒体因子系统性。HD Treg与HD、SP或sp606应当答者共同培育出。(a,b) CFSE转化(a)和CFSE依赖性三份(b)。(c,d) CD25依赖性三份(c)和CD134依赖性三份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在浙大中会的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重更为测试

事实：我们给成的事实是，来自平稳方面子的光阴化遗忘CD4+Treg在GITR理解中会想得到了扩展和丰富，强调了进一步科学研究Treg在1DF冠心病风险生殖中会的互补的必要性。

中文翻译成处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28