囊胚期胚胎二次冷冻复苏移植1例的出生结局和儿童发育上述情况随访

体细胞才会的保鲜保存是特别设计排卵卵新技术(ART)治疗中的的重要分组成部分，通过保鲜保存可以将病变过多的体细胞才会保存下来，大幅提高病变的累积怀孕不下。体细胞才会的 保鲜保存可以在体细胞才会光滑背的假定阶段性同步进唯，如有的中的心时基本上保鲜脱氧核糖核酸期体细胞才会或卵裂期体细胞才会，直到现在随着就是指导体系的完善，更为多的IVF中的心同步进唯幼体培 养以期大幅提高怀孕不下和增加多背怀孕不下，因此比对者不够倾向于同步进唯幼体保鲜保存。保鲜法则可以为程序 所谓慢速保鲜，也可以为活性炭保鲜。我们中的心自 2004年起，对第3天复刻后的体细胞才会全部同步进唯幼体就是指导，如有幼体构成则同步进唯活性炭保鲜保存。然而在药理学管理工只用中的时常存在一些偶发的意外可能会，如病变在停滞不此前复刻日因心肌梗塞性理由并未同步进唯体细胞才会复刻，只能将停滞不此前的体细胞才会丢弃或最终保鲜后择期停滞不此前复刻。但是我们并未就其定幼体二次活性炭保鲜后的确保性如何。目此前为止关于人类体细胞才会二次保鲜的典籍较少，尽管有典籍美联社了一些病唯必需在体细胞才会二次保鲜停滞不此前复刻后获取活产，但这些美联社多为第一次保鲜为脱氧核糖核酸 期体细胞才会或卵裂期体细胞才会，停滞不此前后就是指导至幼体最终保鲜[1。4]。Kumasako等[3]视为二次保鲜不才会增加光滑 背的作物不下，但是关于幼体保鲜停滞不此前后最终保鲜复 苏复刻的美联社极少。且据我们广为人知，已就其定比对来分 析出幼体二次活性炭保鲜停滞不此前复刻后的成生子剧情。在 此病唯美联社中的，我们描述了幼体二次保鲜停滞不此前复刻 后背儿的成生子剧情，并对此病变的父母同步进唯一直 随访仔细观察，详细记录了此青少年的身材高大光滑背可能会。一、药理学将近据病变34岁，此前妻35岁，因直肠因亦同原发早产 到我院排卵卵中的心就诊，早产年限6年。根据世界卫 生子分许多组织标准，新郎阴茎表达式正时常。病变2005年在本 中的心同步进唯直肠抑制后**，在**间隔所有别于的促 排卵方案按照本中的心的时基本上同步进唯，在上一间隔的黄 体期开始领域促性腺激亦同释换激亦同激动剂(GnRH-a)，当垂体降到降恒定后，用**抑制亦同(FSH，果纳芬，默克)同步进唯直肠抑制。当积极支持**直径降到18～ 20 rnlTl时，施打人绒毛膜促性腺激亦同(HCG，艾泽，默克)，38 h后同步进唯乳头超声引导的**缝合来获**巢才会。合计获取13枚卵巢才会，同步进唯时基本上授精后， 13枚卵巢才会排卵，在排卵后第3天仔细观察体细胞才会的卵裂可能会，挑选出2枚优质体细胞才会同步进唯复刻。复刻后全将近的 11枚卵裂期体细胞才会经病变怀疑同意后全部同步进唯幼体就是指导，在排卵后第5日或第6日分别仔细观察幼体构成可能会及结构上。有别于Gardner分将近受控幼体同步进唯分将近，该病变合计构成2枚幼体，幼体分将近分别为4BB和4BC。将所构成的幼体按照我中的心时基本上法则[5]同步进唯活性炭保鲜，明就其操为：幼体保鲜此前同步进唯人工皱缩，即用成像 系统在少离内细胞才会师的体味细胞才会连接不稳固处读卡机，让囊腔液流成，使细胞才会皱缩成师；然后将幼体换入含有7．5％DMSO和7．5％乙二醇的先为连续性液中的连续性 2 min，此后移入活性炭保鲜液中的连续性30 s，将体细胞才会转至 改到保鲜内层(cryoloop内层)上，直接挤出冷藏保存。 病变的食品间隔复刻并未获取怀孕，**3个月于是命 者同步进唯保鲜幼体停滞不此前复刻。人工间隔匆忙腹腔，更年期 第2"-4天唯时基本上B超检验，赋予呋喃尿酸(补佳乐，先灵，德国)低剂量，低剂量剂量根据病变即使如此的腹腔可能会 优所谓(2～18 rag／d)。B超将近据比对腹腔植被可能会，当腹腔厚 度降到8 ITlln时肌肉施打黄体酮(20 rng×2 d，40 mgX 2 d，20；还有一40 mg×1 d)，施打后第6天唯幼体停滞不此前复刻。复刻此前1 d按照我中的心时基本上法则[5]同步进唯幼体停滞不此前：匆忙幼体停滞不此前液，在体细胞才会就是指导皿内所谓学合成0．33 mol／L、0．2 mol／L甘蔗溶液和系统所谓就是指导液(GMoPS Plus， Vitrolife，瑞典)，从冷藏中的取成隙有幼体的保鲜内层，空气 中的停留5 S后，将体细胞才会南至北挤出上述停滞不此前液中的，星期分 别为2 min、3 min和5 min。停滞不此前后的2枚幼体均同步进唯 成像特别设计幼体，选择在少离细胞才会师的半透明隙上部位切削半透明隙的1／4将近。此后将幼体移人提此前匆忙好的 幼体就是指导液(G2，ⅥnDlife，瑞典)中的，换于37℃、6％OQ 和5％Q就是指导盒内就是指导16 h。复刻此前仔细观察幼体的扩展到 和孵成可能会。 该病变在幼体停滞不此前复刻日心肌梗塞急性阑尾炎不能 同步进唯幼体复刻，在病变怀疑同意的此前提下最终按照上述幼体活性炭保鲜操只用步骤同步进唯体细胞才会保鲜。病变手 术6个月后最终同步进唯保鲜幼体停滞不此前复刻，明就其操只用步骤同上，幼体停滞不此前后16 h同步进唯复刻，病变急于怀孕，并于孕38周受孕一卫生子婴孩，特有种52 CITI，BMI3 550 g。 由于这是本中的心第1唯幼体二次保鲜的病变，所以我们对其女同步进唯了一直的随访。父母的父亲体重为 185 cm，双亲体重为167 cm父母1岁时，体重83 cm， BMI12 kg；3岁时，体重97cm，BMI21kg，全身多多 贺，无结核病；5岁时，体重117 cm，BMI31 kg；7岁时，体重135cm，BMI40 kg；9岁时体重154cm，BMI50 kg；12岁时，体重168 cm，BMI62 kg；10岁时，乳房成现光滑背；12岁时更年期免疫缺陷。该女孩性格开朗，参加学校管乐队、校篮球队等集体活动，并取得很好的成绩，其人格正时常，深造成绩在高中学生子此前5名。二、讨论在此病唯中的，病变获取13枚早熟卵巢才会，13枚卵巢才会排卵，经过就是指导后构成2枚幼体并墙身 所谓保鲜保存。病变在先为定幼体停滞不此前复刻日心肌梗塞急性阑尾炎，在其怀疑同意的此前提下将停滞不此前后的幼体最终保鲜保存。此为药理学管理工只用中的一些难以避免的可能会。如果将病变体细胞才会丢弃十分可惜，而体细胞才会最终保鲜保存 的确保性尚为不明就其。到目此前为止为止，虽然仍未有一些光滑 背在二次保鲜后获取活产的病唯美联社，但都是第一次 体细胞才会保鲜都于脱氧核糖核酸期或卵裂期体细胞才会，停滞不此前后就是指导至幼体阶段性最终保鲜。本比对是首次对幼体二次活性炭 保鲜后获取的活产同步进唯一直随访的病唯美联社。 有学者曾经用小鼠体细胞才会比对连续不断保鲜停滞不此前对体细胞才会的傲喇叭，他们注意到与并未保鲜的体细胞才会相比，保鲜体细胞才会 在孵成时的细胞才会将近略少，且小鼠体细胞才会必需在急于的 连续不断保鲜停滞不此前3次后仅仅隙有体外光滑背意志力[6]。在此病唯中的，我们对比了两次保鲜此前后幼体的结构上学转至变，第1次保鲜是在第5天，幼体为4期，恒星质量为 4BB，第一次停滞不此前后就是指导16 h，幼体实质上孵成，成为 6期幼体，恒星质量为6BB；第2次保鲜停滞不此前后，就是指导16 h 幼体恒星质量为6BB。幼体结构上从外观上看，两次保鲜后 并未相可称，幼体细胞才会存活更佳，貌似幼体阶段性体细胞才会的 二次活性炭保鲜对体细胞才会的光滑背无太大傲喇叭。比对原 因，我们视为显然与表列出几个方面有关。首先，幼体在保鲜之此前同步进唯了成像皱缩，将幼体腔内液全部换 成，使幼体腔塌陷，待幼体实质上皱缩后再同步进唯幼体的 活性炭保鲜，这样必需增大保鲜过程中的颗粒的构成， 增加对体细胞才会的破损。有比对也证实幼体的人工皱缩 必需有效大幅提高幼体保鲜后停滞不此前的存活不下[7-9]。而且保鲜幼体停滞不此前后的特别设计幼体也十分重要，在体细胞才会保鲜过程中的，人类幼体的半透明隙变硬，才会限制体细胞才会的向外孵 成，有比对视为幼体在扩展到过程中的不断地膨胀皱缩， 如果在半透明隙成口处卡的次将近多了，幼体就才会衰落[10]。而且，保鲜停滞不此前后的幼体，由于刚刚停滞不此前后囊 光滑腔还处于皱缩状态，体细胞才会和半透明隙二者之间的间或少少 大于卵裂期体细胞才会的间或，因此幼体的特别设计幼体不够确保。我们的将近据集注意到，并未经过特别设计幼体的幼体，停滞不此前后清早就是指导，实质上孵成的比唯(340A)少大于成像幼体后的幼体(85％)，不够高的孵成比唯意味着不够高的着床 机才会。其次，幼体的保鲜保存不同于卵裂期体细胞才会，它 自身有很多灵活性。必需光滑背至幼体阶段性的体细胞才会经过 二次选择，光滑背意志力所致的体细胞才会仍未被无缘；幼体的 细胞才会将近目多，尤其是体味细胞才会层细胞才会，破损后修复意志力强，少将近细胞才会致死后对体细胞才会光滑背意志力傲喇叭小；幼体 的细胞才会不够小，呈梭形，表面积／压强比大，对脱水、复水遭受的压强转至变耐受性不够佳[11]。因此我们并不知道幼体 二次保鲜后细胞才会并未破损的理由显然据信。 目此前为止虽然有一些体细胞才会二次保鲜获取活产的报 道，但是对背儿一直随访的美联社十分相似。在此病唯中的，幼体经过二次活性炭保鲜后，仅仅必需急于 作物，病变在足月受孕一正时常BMI的背儿，也预设 幼体二次保鲜似乎并未必傲喇叭背儿的成生子剧情。复习典籍，我们注意到在2011年的一项小型比对中的，只用 者比对了一次保鲜和二次保鲜后体细胞才会成生子剧情的欠 可称[12]。在篇名的一次保鲜，就是将2PN期或卵裂期的体细胞才会同步进唯保鲜保存，停滞不此前后复刻；二次保鲜就是指的是 保鲜的体细胞才会停滞不此前后同步进唯体外就是指导至幼体阶段性，再进 唯保鲜。结果预设二次保鲜分组的双背不下大于一次保鲜分组，他们视为是二次保鲜分组复刻的体细胞才会将近较少造 成的。此比对还预设二次保鲜分组的成生子BMI略高于 一次保鲜分组，尽管并未统计学相可称；在二次保鲜分组并未 愈演愈烈乃是所致，在一次保鲜分组愈演愈烈1唯乃是所致；两 分组均并未愈演愈烈早产或背儿致死。尽管这些并非幼体 二次保鲜的比对，但从一定亦同质上总结了体细胞才会在二 次保鲜后并未必傲喇叭背儿的成生子剧情。我们对此新 生子儿随访至9岁，该青少年身材高大光滑背正时常，人格光滑背正 时常，潜意识光滑背正时常。与之此前冻融体细胞才会复刻(FET)成 生子青少年的随访结论赞同[13,7]。Pelkonen等比对 了FET成生子父母的乃是所致的愈演愈烈可能会，视为 FET成生子父母愈演愈烈乃是所致的比唯与的食品复刻近似于，此后Pelkonen等[14]对FET始祖父母同步进唯了一 项随访3年的比对，注意到FET与的食品复刻成生子始祖 的身材高大光滑背是近似于的。还有比对注意到ART后成生子 始祖的神经运动光滑背方面与自然怀孕始祖无显著欠 可称，视为他们的神经光滑背、社才会友情及语种深造并无 相可称[117]。可见体细胞才会保鲜对背儿一直光滑背的傲 喇叭与的食品复刻体细胞才会近似于。而从我们的病唯美联社来 看，幼体的二次保鲜也是相对确保的。 我们将幼体二次活性炭保鲜后的体细胞才会同步进唯复刻 后获取急于怀孕，足月受孕一卫生子婴孩，并同步进唯不间断12年的随访，此青少年身材高大光滑背正时常，人格光滑背正时常，潜意识光滑背正时常。视为此幼体二次保鲜后体细胞才会仅仅隙有很好的作物创造力和光滑背创造力。但此病唯仅为个唯美联社，幼体连续不断保鲜是否才会遭受体细胞才会的破损仍不明 就其，复刻连续不断保鲜的体细胞才会是否确保还必需进一步的比对，因此在药理学管理工只用中的，我们仍应尽量避免体细胞才会的连续不断冻融。参考典籍略。重构成处：王雪，甄绿然，孙正怡，郁琦等，幼体期体细胞才会二次保鲜停滞不此前复刻1唯的成生子剧情和青少年光滑背可能会随访[J],排卵卵医学杂志，2018,27(12).